抑菌圈測量 菌落計數分析儀菌落計數儀原理?操作

是一種用于自動測量抗生素或抗菌物質在瓊脂培養基上形成的抑菌圈直徑的設備，其核心原理基于抗菌成分擴散抑制細菌生長，通過圖像識別技術實現高精度、自動化分析。以下是其使用步驟與原理的綜合說明：

?核心原理?

抑菌圈的形成源于抗菌物質（如抗生素、抗菌劑）在瓊脂培養基中的擴散。當含有抗菌成分的紙片、牛津杯或樣品置于接種了敏感細菌的平板時，抗菌物質會向周圍擴散，形成濃度梯度。在抑菌圈區域內，抗菌濃度足以抑制細菌生長，從而形成透明的無菌區域。抑菌圈的直徑或面積與以下因素密切相關：

?抗菌物質的濃度?：濃度越高，抑菌圈通常越大。

?抗菌物質的擴散速率?：擴散越快，抑菌圈越寬。

?細菌的敏感性?：不同菌種對同一抗菌物質的敏感程度不同，如大腸桿菌、金黃色葡萄球菌等常用標準菌株。

?培養條件?：溫度、時間等影響擴散和生長。

現代抑菌圈測量儀采用?高分辨率成像系統?（如CCD相機、雙光源掃描）獲取平板圖像，通過智能算法（如圓弧擬合、邊緣檢測）自動識別抑菌圈邊界，測量直徑、面積等參數，誤差可控制在0.5%以內，并支持數據審計追蹤與報告生成?

?使用步驟?

?滅菌處理?

對所有實驗器具（如培養皿、移液器、紙片）、菌液及培養基進行嚴格滅菌，避免雜菌污染影響結果?

?菌懸液制備?

將標準試驗菌（如大腸桿菌、金黃色葡萄球菌）接種于營養瓊脂培養基，37℃培養24小時后，刮取單菌落制備成濃度一致的菌懸液（通常為0.5麥氏濁度）?

?樣品放置與培養?

將滅菌后的抗菌紙片、牛津杯或樣品載體置于已均勻涂布菌液的瓊脂平板

將平板倒置放入37℃恒溫培養箱，培養24–48小時，使抗菌物質充分擴散并形清晰的抑菌圈?

?儀器測量?

將培養后的平板放入抑菌圈測量儀，啟動掃描程序。

儀器自動捕捉圖像，通過軟件識別抑菌圈邊緣，選擇測量模式（自動、擬圓或手動校正）?

系統自動計算直徑、面積，并與內置標準數據庫（如CLSI標準）比對，評估抗菌效價?

?數據分析與報告?

定性判斷：抑菌圈直徑≥5毫米通常視為陽性結果，表明樣品具有抗菌活性?

定量分析：通過抑菌圈大小與標準曲線比較，折算出抗生素效價（如IU/mL）?

結果可導出為Excel或PDF報告，支持數據追溯與GLP規范?

?補充說明?

?常用方法?：抑菌圈法包括K-B法（濾紙片法）、牛津杯法和打孔法，其中K-B法因標準化程度高，廣泛用于藥敏試驗?

?儀器優勢?：全自動設備可同時處理多個平板，計數速度達150–800個菌落/秒，顯著提升效率，減少人為誤差?

綜上，抑菌圈測量儀將傳統微生物檢測與現代圖像分析技術結合，實現了抗菌性能評估的標準化、自動化與高通量